Um método de microdiluição em caldo para teste de suscetibilidade a antibióticos de bactérias Gram-positivas

Isole as colônias bacterianas Gram-positivas de uma placa de cultura e suspenda-as em um meio.

Diluir a suspensão para atingir a concentração bacteriana ideal para o ensaio.

Inocular os alvéolos de ensaio de uma microplaca contendo concentrações crescentes de um antibiótico lipoglicopeptídico e de um alvéolo de controlo do crescimento contendo apenas o meio.

Espalhe uma alíquota do poço de controlo nas placas de cultura para verificar a pureza da cultura e a contagem bacteriana.

Incubar para permitir o crescimento bacteriano, durante o qual a parede celular é sintetizada.

O antibiótico se liga ao peptidoglicano, um componente da parede celular, e seus precursores, inibindo a polimerização e enfraquecendo a parede.

A interrupção permite que a pressão osmótica cause lise celular.

Após a incubação, confirme a pureza da cultura e a contagem bacteriana ideal.

Inspecione os poços quanto ao crescimento bacteriano.

O poço de controle mostra crescimento visível, enquanto o poço de teste com a menor concentração de antibiótico que inibe completamente o crescimento indica a concentração inibitória mínima (CIM).

Nesta demonstração, uma placa recém-preparada será inoculada. Para preparar o inóculo, selec