Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Microbiologia
0 visualizações • 2:58 min. • August 29th, 2025
Pegue uma lâmina com câmara contendo células epiteliais humanas com endossomos marcados com fluorescência.
Introduza bactérias patogênicas intracelulares e incube, permitindo que elas adiram às células.
As bactérias injetam proteínas que reorganizam o citoesqueleto do hospedeiro, formando saliências de membrana que internalizam as bactérias em vacúolos.
Esses vacúolos estendem projeções tubulares conectando-se ao sistema endolisossomal, uma rede de vesículas e organelas que regulam o tráfego intracelular.
Essas projeções redirecionam o transporte da vesícula e remodelam o sistema endolisossomal.
Lave para remover bactérias extracelulares e, em seguida, incube com um meio contendo antibióticos para eliminar quaisquer bactérias restantes.
Substitua por um meio de imagem sem soro contendo o antibiótico e adicione nanopartículas marcadas com um fluoróforo contrastante.
Incubar para permitir a entrada de nanopartículas via endocitose e acúmulo nas vesículas remodeladas.
Lave para remover nanopartículas não internalizadas e, em seguida, incube em um meio de imagem suplementado com soro.
As nanopartículas fluorescentes e os endossomos marcados permitem a visualização da remodelação endolisossomal
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