Ensaio de fototaxia de cianobactérias filamentosas usando iluminação de luz focalizada

0 vistas3:22 min • September 26th, 2025

Comece com um prato contendo uma cultura de cianobactérias filamentosas posicionada sobre uma pequena janela equipada com um suporte montado em LED em uma sala escura.

O LED ilumina o prato por baixo, criando uma pequena zona de luz.

Durante a incubação, as cianobactérias filamentosas migram em direção ao centro iluminado, demonstrando fototaxia.

Com o tempo, as cianobactérias migram e se acumulam no centro iluminado, formando uma zona bacteriana visivelmente densa.

Após a incubação, coloque um papel branco embaixo do prato para aumentar o contraste.

Capture uma imagem da área iluminada e analise-a usando um software.

Desenhe uma linha no prato que passa pelo centro da zona bacteriana para gerar um perfil de intensidade de pixel.

Compare a intensidade média de pixels fora e dentro da zona bacteriana.

Em seguida, desenhe uma linha na intensidade máxima dentro da região central para determinar o diâmetro da zona bacteriana, que representa a fototaxia cianobacteriana.

Prepare suportes de LED onde os LEDs de cinco milímetros são montados para irradiar uma área de 20 milímetros quadrados de baixo para cima. Meça e ajuste as intensidades do LED. Certifique-se de que todo o cenário esteja em uma sala escura ou em um recipiente fechado e escuro.

Coloque oito mililitros do meio contendo P. lacuna em uma placa de Petri de seis centímetros, feche a placa de Petri com a tampa e coloque-a em um suporte de LED de forma que o LED fique no centro da placa de Petri. Depois de dois dias, capture uma imagem da placa de Petri com uma câmera de smartphone apontada diretamente para a posição do tratamento de luz. Use um suporte e um lençol branco como plano de fundo para garantir as mesmas condições de distância e luz para todas as fotos.

Abra o software ImageJ, clique em Arquivo, Abrir e selecione o arquivo. Em seguida, clique em Enter. Selecione o botão reto e pressione o botão esquerdo do mouse para desenhar uma linha de uma extremidade da placa de Petri até a extremidade oposta.

Certifique-se de que a linha passe pelo centro do círculo de filamentos. Clique em Analisar e Medir para ver o comprimento da placa de Petri. Em seguida, clique em Analisar e plotar perfil no menu ImageJ.

Estime um valor médio para a intensidade do pixel fora do círculo e outro valor médio para a intensidade do pixel dentro do círculo. Aponte o mouse para a posição Y entre esses valores para estimar os valores X de ambos os lados do círculo. Anote os dois valores e calcule a diferença.

Em seguida, selecione o botão reto e desenhe uma linha no valor médio-máximo da intensidade do pixel. Por fim, clique em Analisar e depois em Medir para obter o comprimento do círculo celular interno.

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Última atualização: 29 agosto 2026