Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Microbiologia
0 visualizações • 2:39 min. • September 26th, 2025
Comece com embriões de peixe-zebra anestesiados injetados com bactérias patogênicas marcadas com fluorescência, isoladamente ou misturadas com microesferas de biomaterial, para modelar a infecção associada ao biomaterial in vivo.
Colocar uma placa de Petri contendo meios basais com anestésico no palco de um microscópio de fluorescência estéreo equipado com filtros apropriados.
Adicione solução de metilcelulose ao prato para criar um meio viscoso que imobiliza os embriões para imagem.
Transfira embriões individuais para a metilcelulose e alinhe-os horizontalmente, garantindo que o local da injeção seja visível.
Usando o filtro de campo claro, concentre-se no local da injeção para atingir a região infectada.
Defina os parâmetros de imagem da pilha Z e adquira imagens de fluorescência em diferentes profundidades para capturar a dinâmica da infecção em três dimensões.
Usando um software, analise as imagens capturadas ao longo do tempo para quantificar a intensidade da fluorescência e monitorar a distribuição bacteriana.
Este protocolo permite uma comparação direta da progressão da infecção em embriões vivos com e sem exposição ao biomaterial.
Coloque uma placa de Petri de 100 milímetros conten
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