Isolamento de colônias bacterianas direcionadas usando degradação de hidrogel com padrão de luz

Pegue uma lamínula com uma camada de hidrogel fotodegradável que contém colônias bacterianas aprisionadas, geneticamente modificadas para emitir fluorescência.

Coloque a lamínula em um suporte.

Adicione meios para evitar a desidratação da amostra.

Sob um microscópio de campo claro, concentre-se em uma única colônia de interesse.

Usando o software apropriado, projete um padrão de luz para extração de células na periferia da colônia para quebrar as ligações estruturais do hidrogel e minimizar a exposição UV às células.

Ajuste a intensidade da luz UV e a duração da exposição.

Inicie a exposição à luz UV para quebrar as ligações estruturais no hidrogel nas áreas expostas que facilitam a liberação da colônia alvo.

Usando um filtro de fluorescência, identifique a colônia.

Coloque uma ponta de tubo no local, com a outra extremidade conectada a uma seringa.

Mude para o modo de campo claro e, usando a seringa, aspire a colônia liberada.

Transfira a colônia para um tubo para análise posterior.

Coloque a amostra em um suporte PDMS e adicione o meio definido em cima da amostra para evitar a desidratação da amostra e fornecer uma solução transportadora para as células liberadas. Depois de colocar o espelh