Ensaio de Coincubação para Estudo de Interações Competitivas entre Cepas Bacterianas

Comece com duas cepas bacterianas, uma referência e uma concorrente, cada uma expressando um marcador fluorescente distinto para identificação da cepa.

Misture as cepas em proporções iguais e coloque a mistura em um prato de ágar.

Incube a placa para permitir que as cepas cresçam e interajam.

O competidor supera a cepa de referência por meio de mecanismos dependentes ou independentes de contato.

Na competição dependente de contato, o competidor usa sistemas de secreção especializados para entregar toxinas diretamente na cepa de referência.

Na competição independente de contato, o competidor libera toxinas que se difundem no meio circundante e entram na cepa de referência.

Essas toxinas interrompem processos essenciais na cepa de referência, incluindo síntese da parede celular, replicação do DNA e síntese de proteínas, levando à interrupção do crescimento, morte celular e redução da expressão de fluorescência.

Após a incubação, examinar a placa ao microscópio de fluorescência.

A fluorescência reduzida na cepa de referência, em comparação com a fluorescência mais brilhante do concorrente, indica interações competitivas.

Para misturar a cepa de referência e a cepa concorrente em uma proporção