Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Microbiologia
0 visualizações • 2:49 min. • September 26th, 2025
Coloque uma lâmina de microarray esterilizada e revestida de agarose com vários pontos de polímero em uma placa multipoços. A agarose minimiza a ligação bacteriana inespecífica.
Adicione uma cultura bacteriana mista à lâmina e incube-a com agitação suave.
As bactérias secretam proteínas de adesão distintas que se ligam a pontos de polímero favoráveis, resultando em uma ligação bacteriana mais forte e colonização ao longo do tempo.
Por outro lado, os polímeros repelentes resistem à adsorção de proteínas e reduzem a fixação bacteriana.
Enxágue a lâmina com solução salina tamponada com fosfato ou PBS para remover bactérias fracamente ligadas.
Adicione DAPI para corar o DNA de bactérias ligadas à superfície.
Lave a lâmina com PBS, seque-a e sele-a com uma lamínula adesiva.
Esterilize a superfície externa da lâmina com etanol.
Capture imagens de campo claro para localizar os pontos de polímero. Em seguida, mude para o modo de fluorescência para detectar a fluorescência nos pontos de polímero.
Manchas de polímero que exibem fluorescência reduzida indicam ligação bacteriana mínima e são identificadas como polímeros repelentes de bactérias.
Após a cultura e preparação do inóculo para os microarrays,
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