Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Microbiologia
0 visualizações • 3:16 min. • September 26th, 2025
Comece com uma amostra de água que contenha bactérias transmitidas pela água e filtre-a para remover os detritos.
Transfira o filtrado diluído para placas de ágar com baixo teor de nutrientes, cada uma suplementada com um antibiótico específico. Espalhe o filtrado e incuba.
As bactérias portadoras de um gene específico de resistência a antibióticos crescem nas placas antibióticas correspondentes e formam colônias.
Conte as colônias para determinar as unidades formadoras de colônias (UFCs), representando o número de bactérias resistentes a antibióticos.
Selecione uma única colônia de cada placa e suspenda-a em água destilada estéril.
Aqueça a suspensão para lisar as células e liberar o conteúdo intracelular, incluindo o DNA bacteriano que contém o gene de resistência a antibióticos.
Centrifugue os tubos para separar os detritos e recolher o sobrenadante que contém o ADN.
Adicione reagentes de amplificação ao DNA extraído.
Coloque os tubos em um termociclador e execute o programa para amplificar uma região específica do DNA bacteriano.
O DNA amplificado está pronto para análise de sequência para identificar o gene de resistência a antibióticos.
Processe a amostra de água assepticamente, filtra
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