JoVE Encyclopedia of Experiments
Microbiologia
0 vistas • 2:02 min • September 26th, 2025
Comece com um tubo contendo uma cultura bacteriana geneticamente modificada para atuar como um biossensor.
A bactéria abriga um sistema de plasmídeo com uma proteína fluorescente vermelha ou gene RFP sob o controle de um promotor. O promotor é reprimido por uma proteína sensível à presença de um analito específico, como o chumbo.
Use um pano à base de etanol para limpar completamente uma superfície de teste e colete o analito presente na superfície.
Corte uma pequena seção do centro do lenço e mergulhe-o completamente na cultura bacteriana.
Incubar para facilitar a difusão do analito do lenço para a cultura bacteriana.
O analito entra na bactéria e se liga à proteína repressora, alterando sua conformação e ativando o promotor.
O promotor ativado inicia a transcrição do gene, levando à expressão da RFP.
Medir a fluorescência bacteriana para garantir a presença da substância a analisar na superfície de ensaio.
Use um lenço à base de etanol projetado para remover o chumbo para limpar todas as superfícies das mãos, inclusive entre os dedos. Guarde os lenços em um saquinho lacrado devidamente rotulado até a análise. Use um lenço à base de álcool para limpar todas as superfícies grandes a serem testadas.
Use uma troca de algodão umedecida com etanol para limpar todas as pequenas superfícies a serem testadas. Usando luvas limpas e tesouras limpas com álcool, corte uma seção de aproximadamente um centímetro quadrado do centro do lenço. Em seguida, coloque o pedaço cortado de lenço, ou cotonete, diretamente em um tubo de cultura contendo dois mililitros da bactéria sensora e certifique-se de que esteja completamente submerso no caldo.