Ensaio de enxame para visualização da motilidade da superfície bacteriana

Comece com um tubo contendo bactérias móveis que expressam proteína fluorescente verde.

Usando uma agulha, coloque as bactérias em uma placa de ágar nutriente macio para estudar a motilidade da superfície bacteriana.

Em seguida, inverta a placa para evitar a condensação de água na superfície do ágar.

Incube a placa para permitir que as bactérias cresçam.

À medida que a incubação avança, as bactérias usam seus flagelos para iniciar a migração para fora do ponto de inoculação.

Quando a incubação estiver concluída, abra a tampa e coloque a placa invertida em um sistema de imagem, com o lado do ágar voltado para o detector óptico, para garantir imagens precisas.

Coloque a tampa cheia de água acima do prato. Sele-o para manter um ambiente úmido.

Feche o sistema de imagem e inicie a aquisição de imagens com lapso de tempo.

Com o tempo, a migração bacteriana gera projeções verdes semelhantes a dedos chamadas gavinhas. Essas estruturas bacterianas se estendem para fora do ponto central de inoculação, confirmando a motilidade da superfície bacteriana.

Inocule de um a cinco microlitros da cultura noturna sobre as placas de ágar de enxame secas cutucando a superfície do ágar com um palito de dente est