Comparação fenotípica de cepas selvagens e mutantes de Streptomyces coelicolor

Comece com culturas de cepas selvagens e mutantes de Streptomyces coelicolor, uma bactéria filamentosa do solo.

As cepas mutantes carregam mutações em genes de desenvolvimento que causam diferenças fenotípicas do tipo selvagem.

Recultive as colônias em placas frescas para minimizar o acúmulo de mutações espontâneas com a idade.

Listre colônias únicas das cepas em regiões separadas de uma placa em um padrão de cunha para evitar contaminação cruzada

Incube a placa para promover o crescimento bacteriano.

As cepas do tipo selvagem formam filamentos aéreos que se desenvolvem em longas cadeias de esporos pigmentados de cinza, dando às colônias uma aparência difusa.

Em contraste, as cepas mutantes não conseguem desenvolver filamentos aéreos, resultando em uma aparência careca, ou produzem menos esporos pigmentados, fazendo com que os filamentos aéreos pareçam brancos.

Coloque a placa de Petri em um fundo uniforme para visualizar a morfologia da colônia.

Capture imagens para comparar visualmente as diferenças fenotípicas entre as cepas selvagens e mutantes.

Use um método padrão, como o método de listras de quadrante demonstrado em Saunders 2012 para listrar cepas de Streptomyces em placas de ágar M