Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Microbiologia
0 visualizações • 2:05 min. • September 26th, 2025
Comece com um tubo estéril contendo um meio de crescimento específico do hospedeiro. Adicione uma cultura bacteriana hospedeira cultivada durante a noite.
Em seguida, introduza um filtrado contendo Saccharibacteria, uma bactéria parasita ultrapequena, para estabelecer uma cultura binária.
Incubar a cultura binária em condições microaeróbicas ideais para a bactéria hospedeira.
Os nutrientes do meio promovem o crescimento e a proliferação de bactérias hospedeiras, tornando a cultura turva.
Devido à sua natureza parasitária obrigatória, as Saccharibacteria se ligam à superfície das células bacterianas hospedeiras.
Essas bactérias então formam contatos estreitos da membrana com o hospedeiro e extraem nutrientes essenciais para sua sobrevivência e proliferação.
À medida que a infecção progride, o crescimento do hospedeiro bacteriano diminui, resultando em turbidez reduzida.
Para apoiar o crescimento contínuo, transfira a cultura binária para um meio fresco em intervalos regulares.
Isso mantém a viabilidade do hospedeiro e promove a estabilidade a longo prazo da cultura binária.
Prepare os tubos de cultura aliquotando dois mililitros de meio de crescimento apropriado nos tubos.
Em seguida, adicione 200 microlitros de cultura noturna de organismos hospedeiros e 100 a 200 microlitros de amostra filtrada ressuspensa a cada tubo. Incubar as amostras combinadas em condições apropriadas para o organismo hospedeiro. Passe as células a cada dois ou três dias, transferindo 200 microlitros da cultura binária para dois mililitros de meio de crescimento fresco em um novo tubo.
Se as culturas passadas não apresentarem crescimento a 200 microlitros de cultura hospedeira não infectada, ao passar as células, devolva os tubos inoculados à incubadora.