Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Microbiologia
0 visualizações • 4:20 min. • September 26th, 2025
Comece com uma placa de vários poços contendo meios de crescimento pré-inoculados com bactérias produtoras de celulose.
No poço tratado, o meio é suplementado com ácido 2-cloroetilfosfônico (CEPA).
Sele a placa para evitar trocas gasosas e incuba.
Durante a incubação, o CEPA hidrolisa e libera etileno, uma molécula gasosa.
O etileno ativa a celulose sintase bacteriana, que utiliza a UDP-glicose citosólica para sintetizar celulose.
Com o tempo, as bactérias expulsam celulose através de sua membrana.
Isso promove a automontagem bacteriana na interface ar-líquido, formando um biofilme flutuante à base de celulose, ou película.
Após a incubação, transfira as películas para uma nova placa de vários poços. Adicione uma solução alcalina e incube a uma temperatura mais alta para lisar as células.
Remova a solução alcalina. Lave repetidamente com agitação para remover os detritos celulares enquanto retém a celulose.
Seque e pese as películas. Um maior peso seco nas amostras tratadas com CEPA em comparação com o controle indica maior produção de celulose bacteriana em resposta ao etileno.
O ensaio de película é uma ferramenta de análise padrão para a produção de celulose bacteriana. A PH e a análise m
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