Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Microbiologia
0 visualizações • 3:05 min. • September 26th, 2025
Um esporo bacteriano permanece dormente devido a uma camada de córtex peptidoglicano, um polímero de açúcares e aminoácidos.
Durante a germinação, o córtex se degrada para liberar açúcares no meio circundante.
Para detectar a degradação do córtex, comece com o meio que contém os açúcares liberados, coletados em pontos de tempo definidos durante a germinação dos esporos.
Utilizar como referência as concentrações crescentes de açúcares.
Os padrões e as amostras foram submetidos a um tratamento prévio para converter os açúcares em uma forma reativa.
Incube com o reagente de Ehrlich, um reagente de detecção colorimétrica que reage com açúcares e forma um complexo de cor roxa.
Transfira as misturas para uma placa multipoços e meça a absorbância dos complexos coloridos usando um leitor de microplacas.
A absorbância corresponde à intensidade da cor roxa, que é diretamente proporcional à concentração de açúcar.
Um aumento na absorbância entre as amostras de ponto de tempo indica degradação progressiva do córtex.
Gere um gráfico a partir das concentrações padrão e quantifique as concentrações da amostra.
Enquanto as amostras estão no gelo, prepare o reagente de cor. Dissolva 0,320 gramas de DMAB em 1
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