JoVE Encyclopedia of Experiments
Microbiologia
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Comece com culturas de espécies Gram-negativas de Yersinia e não-Yersinia Enterobacteriaceae.
Usando inoculadores de agulha estéreis, pontilhar as culturas em Cefsulodin-Irgasan-Novobiocina tradicional ou ágar CIN e ágar NIC modificado.
Incube as placas para promover o crescimento bacteriano.
Tanto os ágares CIN tradicionais quanto os modificados suportam o crescimento de Yersinia e Enterobacteriaceae não Yersinia que fermentam manitol para produzir subprodutos ácidos.
A produção de ácido reduz o pH e desencadeia uma mudança de cor, resultando em uma morfologia característica da colônia centrada no vermelho.
O ágar CIN modificado contém substratos adicionais que detectam atividades enzimáticas específicas expressas por não-Yersinia Enterobacteriaceae.
Essas bactérias metabolizam os substratos, resultando em mudanças de pH ou produção de pigmentos que alteram a morfologia das colônias.
Em contraste, as espécies de Yersinia mantêm sua aparência característica centrada no vermelho.
Como resultado, o ágar CIN modificado permite a diferenciação entre espécies de Yersinia e não-Yersinia Enterobacteriaceae com base em suas atividades metabólicas distintas.