Avaliação da respiração bacteriana em resposta a nanopartículas de prata

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Comece com uma pasta contendo células bacterianas tratadas com nanopartículas de prata suspensas em uma matriz de exopolissacarídeos.

Adicione um tampão fosfato à pasta para manter um pH estável.

Em seguida, introduza uma solução contendo glicose e um indicador redox solúvel e, em seguida, incube a mistura. O indicador redox atua como um aceptor de elétrons.

Durante a incubação, a glicose e o indicador redox entram nas células bacterianas metabolicamente ativas.

As células utilizam glicose durante a respiração, gerando elétrons.

Esses elétrons reduzem o indicador redox a um precipitado insolúvel de cor vermelha, que se acumula nas bactérias.

Centrifugue a mistura para separar as células bacterianas e descarte o sobrenadante.

Adicione o metanol e agite suavemente para dissolver o precipitado acumulado na membrana, formando uma solução colorida.

Meça a intensidade da cor da solução.

Comparar a intensidade medida com uma curva padrão para determinar a concentração do precipitado solubilizado que se correlaciona com os níveis de respiração celular.