Visualização de interações bacterianas unicelulares

Comece com uma lamínula de vidro semeada com uma cocultura de bactérias móveis marcadas com fluorescência e bactérias imóveis não rotuladas.

Pegue o prato que contém uma almofada de agarose com infusão de nutrientes e remova cuidadosamente o molde de silicone ao redor.

Incline o prato e use uma espátula dobrada para deslizar sob a borda da almofada. Em seguida, coloque-o na tampa de uma placa de Petri.

Transfira a almofada, com a parte inferior para baixo, para o prato que contém as células bacterianas para garantir um contato uniforme com a camada bacteriana.

Pressione suavemente a almofada para eliminar quaisquer bolhas de ar.

Coloque os lenços umedecidos ao redor da borda do prato para manter a umidade.

Sob um microscópio invertido, rastreie o comportamento bacteriano ao longo de um período de tempo.

À medida que as bactérias crescem, as bactérias imóveis liberam atrativos químicos. As bactérias móveis sentem esses sinais e se movem em direção às colônias bacterianas imóveis.

Com o tempo, as bactérias móveis se acumulam e invadem colônias bacterianas imóveis, confirmando as interações bacterianas.

Quando as almofadas estiverem secas, pipete um microlitro de co-cultura uniformemente no fu