Medindo a ligação do medicamento ao caseum de lesões de tuberculose por meio do método de diálise de equilíbrio rápido

Tome uma suspensão homogênea de caseum - o material necrótico e rico em lipídios das lesões da tuberculose, que abriga micobactérias tolerantes a medicamentos em seu núcleo.

Adicione o medicamento de teste ao homogeneizado e ao vórtice para facilitar sua interação com a matriz do caseum.

Coloque uma inserção de diálise rápida contendo câmaras doadoras e receptoras separadas por uma membrana semipermeável na placa de base.

Carregue o homogenato enriquecido com drogas na câmara doadora e adicione tampão à câmara receptora.

Sele a placa e incube com rotação.

Durante a incubação, o fármaco livre se difunde através da membrana, atingindo o equilíbrio entre as duas câmaras.

Uma vez alcançado o equilíbrio, diluir a amostra doadora com tampão e a amostra receptora com homogeneizado livre de drogas para normalizar as condições da matriz para quantificação de drogas.

Finalmente, quantifique a concentração do medicamento e calcule a fração de medicamento não ligada ou fu.

O fu reflete a droga livre disponível para se difundir em caseum e atingir micobactérias tolerantes a drogas.

Adicione 6,5 microlitros do composto de teste preparado a 643,5 microlitros do homogeneizado. Para atingir a concentração f