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Microbiologia
0 vistas • 2:52 min • October 30th, 2025
Comece inoculando uma suspensão de bactérias redutoras de metal em um meio de cultura com íons metálicos.
Incubar com rotação para promover o crescimento e facilitar a absorção de íons metálicos.
Os íons metálicos se difundem nas células e são enzimaticamente reduzidos a óxidos metálicos insolúveis.
Esses óxidos são excretados e nucleados perto da membrana bacteriana, onde se auto-montam em microcápsulas rígidas de óxido metálico fora das células.
Após a incubação, ultrassonizar a suspensão para dissociar as bactérias das microcápsulas.
Centrifugue a mistura para pellet as microcápsulas densas e descarte o sobrenadante.
Lave o pellet com água e ultrasonicate. Centrifugue novamente para separar as bactérias das microcápsulas.
Em seguida, adicione etanol para reduzir a tensão superficial.
Ultrassonicar novamente para desalojar quaisquer bactérias remanescentes e dispersar as microcápsulas.
Centrifugue novamente e descarte o sobrenadante.
Repita a lavagem com etanol.
Por fim, sele os tubos para evitar o ressecamento e a deformação das microcápsulas purificadas.
Recupere a cultura contendo a bactéria monoclonal e adicione 50 microlitros dela em cada um dos dez tubos de centrífuga de 50 mililitros contendo o meio de tungstato de sódio.
Incube os dez tubos em uma incubadora de 37 graus Celsius por 120 horas. Após a incubação, colocar cada um dos tubos em um ultrassônico e sonicar as células a 20 kilohertz com 150 watts por uma hora.
Centrifugue os tubos e remova o líquido claro com uma pipeta.
Em seguida, adicione água e, em seguida, sonice e centrifugue os tubos mais uma vez.
Após a segunda centrifugação, remova o líquido claro dos tubos com uma pipeta.
Em seguida, adicione 35 mililitros de etanol a 99,8% e ultrassonice as amostras novamente.
Enxágue os minerais centrifugando-os, adicionando álcool e sonicando a amostra mais uma vez.
Em seguida, remova o líquido transparente dos tubos com uma pipeta e tampe imediatamente os tubos sem secar a amostra.