Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Microbiologia
0 visualizações • 2:31 min. • October 30th, 2025
Comece com câmaras eletroquímicas contendo uma superfície de eletrodo condutor coberta com um biofilme monocamada de micróbios eletroativos.
Esses micróbios utilizam citocromos da membrana externa para transferir elétrons intracelulares para o eletrodo por meio do transporte de elétrons extracelular, ou EET, gerando corrente.
Esse fluxo de elétrons é acoplado à transferência de prótons para manter o equilíbrio de carga através da membrana.
Na câmara de teste, introduza um pequeno volume de óxido de deutério, ou D₂O.
O deutério substitui os prótons e se move lentamente, reduzindo a transferência de elétrons acoplados a prótons e diminuindo a corrente. A adaptação microbiana leva à recuperação parcial da corrente.
Adicione sequencialmente concentrações crescentes de D₂O e monitore as mudanças atuais.
Na câmara de controle, adicione um volume igual de H₂O para fornecer prótons em movimento rápido que suportam o fluxo de elétrons e estabilizam a corrente.
Calcule o efeito do isótopo cinético, a razão entre a produção de corrente na presença de D₂O e H₂O, para confirmar que a transferência de prótons influencia o EET em biofilmes eletroativos.
Confirme se a produção atual de um biofilme monocamada de Shewanella MR-1 é estável e não aumenta rapidamente. Se a corrente aumentar acentuadamente, espere até que a corrente se estabilize com um aumento de 5% em 10 minutos.
Extremamente lenta e suavemente, adicione 40 microlitros de anóxico 50 por cento de volume D2O no reator eletroquímico usando uma seringa de forma que a concentração seja de 0,5 por cento de volume D2O no reator.
Para evitar danos ao biofilme pela adição de D2O, injete o D2O gota a gota. Aguarde a corrente se estabilizar e, posteriormente, adicione o D2O até 4,0 por cento do volume para obter o valor KIE, que é a razão entre a produção atual e a presença de D2O e H2O.
Verifique o efeito do mesmo volume de adição de H2O na produção atual.