Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Microbiologia
0 visualizações • 2:24 min. • October 30th, 2025
Pegue as bactérias do tipo selvagem e as bactérias mutantes que não possuem um gene específico responsivo a metais presente no tipo selvagem.
As bactérias são cultivadas em meios empobrecidos em metal para esgotar suas reservas internas de metal.
Nesse ambiente empobrecido em metais, o gene responsivo a metais em bactérias do tipo selvagem é ativado e expressa um receptor de superfície, que está ausente em bactérias mutantes.
Diluir as culturas para garantir uma densidade celular uniforme.
Pegue uma placa multipoços contendo um complexo metal-proteína.
Adicione as culturas diluídas aos poços.
Incube a placa dentro de um leitor de placas mantido a uma temperatura controlada com agitação para promover o crescimento bacteriano ideal.
Meça a absorbância em intervalos regulares para monitorar o crescimento bacteriano ao longo do tempo.
Em bactérias do tipo selvagem, o receptor de metal permite a extração do íon metálico do complexo, apoiando seu crescimento.
As bactérias mutantes apresentam crescimento restrito, pois não conseguem extrair o íon metálico do complexo sem os receptores metálicos.
Adicione 10 microlitros de pré-mistura 10X e 90 microlitros de MDL a cada um dos três poços para os cont
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