Sincronização de cultura de cianobactérias e compactação de DNA impulsionadas por ciclos claro-escuro
Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Microbiologia
0 visualizações • 3:17 min. • October 30th, 2025
Comece com uma placa de ágar rica em nutrientes suplementada com tiossulfato.
Risque as cianobactérias e incube sob períodos alternados de luz e escuridão para manter o ciclo circadiano.
Durante o período de luz, a absorção de nutrientes e o tiossulfato apoiam o crescimento bacteriano e a condensação do DNA.
No período escuro, as células conservam energia e se dividem.
O ciclo alternado claro-escuro sincroniza as células com o mesmo estágio de crescimento e divisão.
Após o período de luz, adicione uma solução de sacarose e pipete repetidamente para liberar cianobactérias, causando uma mudança de cor. Transfira as células para um tubo.
Adicione um corante fluorescente específico para DNA e incube no escuro. O corante se liga ao DNA da cianobactéria.
Centrifugue para separar as cianobactérias e remover o sobrenadante.
Ressuspenda as cianobactérias em solução de sacarose, transfira a suspensão para uma lâmina e cubra-a.
Sob um microscópio de fluorescência, o DNA condensado azul nas células confirma a progressão sincronizada e regulada pelo circadiano do ciclo celular das cianobactérias.
Comece com o crescimento de cianobactérias em placas BG-11 esterilizadas de nove centímetros contendo 1,5% de
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