Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Microbiologia
0 visualizações • 2:15 min. • September 26th, 2025
Os plastoglóbulos são gotículas ricas em lipídios no citoplasma de cianobactérias.
Eles armazenam lipídios neutros dentro de um núcleo hidrofóbico, cercado por uma monocamada lipídica anfipática com proteínas estruturais e enzimáticas incorporadas. Os lipídios armazenados são mobilizados durante o estresse para apoiar as funções celulares.
Para isolá-los, comece com uma fração bruta de plastoglobulos obtida de cianobactérias. Esta fração é enriquecida em plastoglóbulos e inclui algumas proteínas contaminantes residuais.
Misturar esta fracção com uma solução de sacarose mais densa e transferi-la para um tubo de ultracentrifugação.
Cubra com uma solução de sacarose mais leve para criar um gradiente de densidade descontínuo.
Centrifugue em alta velocidade sob condições frias para evitar a degradação térmica dos plastoglóbulos.
O gradiente separa os componentes por densidade: plastoglóbulos ricos em lipídios e de baixa densidade flutuam para o topo, enquanto contaminantes mais densos e ricos em proteínas afundam.
Colete os plastoglóbulos purificados e congele-os rapidamente em um meio de congelamento para preservar sua estrutura.
Armazene em temperaturas ultrabaixas para uso a longo prazo.
Para
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