Avaliação da colonização bacteriana intestinal em C. elegans livre de germes

0 visualizações • 3:22 min. • October 30th, 2025

Comece com vermes C. elegans adultos livres de germes suspensos em meios.

Introduzir a bactéria de ensaio e incubar.

À medida que os vermes se alimentam, as bactérias entram no lúmen intestinal e aderem ao epitélio.

Centrifugue para peletar os vermes e remover as bactérias não ingeridas.

Ressuspenda em tampão, centrifugue e remova as bactérias não ingeridas restantes.

Adicione meios contendo E. coli morta pelo calor e incuba.

Durante a alimentação, a E. coli morta pelo calor desloca e expele as bactérias de teste não aderidas do lúmen intestinal.

Centrifugue e remova o sobrenadante contendo as bactérias expelidas.

Lave com tampão, centrifugue e remova o sobrenadante.

Resfrie os vermes no gelo para induzir a paralisia, evitando mais ingestão.

Adicione uma solução de alvejante e incube para matar as bactérias externas residuais.

Remova o alvejante e adicione tampão frio.

Centrifugue e remova o sobrenadante para eliminar o alvejante residual.

Os vermes agora retêm apenas bactérias de teste viáveis aderidas ao epitélio intestinal, permitindo a quantificação da colonização.

Comece ressuspendendo a amostra de verme em um mililitro de M9TX-01 em um tubo de microcentrífuga. Colete os vermes adultos por

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