Cultivando a bactéria de crescimento rápido Vibrio natriegens

Pegue um tubo contendo uma cultura de Vibrio natriegens, uma bactéria de crescimento rápido.

Centrifugue a cultura para pellet as bactérias. Rejeitar o sobrenadante que contém meios residuais.

Ressuspender o sedimento bacteriano em meio fresco e transferi-lo para um balão cónico contendo o mesmo meio para a preparação da cultura bacteriana.

Incube a cultura com agitação sob condições aeradas.

Devido a um curto tempo de geração, o Vibrio natriegens utiliza nutrientes e se divide rapidamente para gerar uma população bacteriana concentrada.

Usando um espectrofotômetro, monitore regularmente a densidade óptica (DO) para determinar a concentração bacteriana.

Cultive a cultura até que a DO atinja aproximadamente um, indicando uma fase de crescimento exponencial com alta atividade metabólica.

Transfira a cultura para tubos de centrífuga.

Centrifugue a baixa temperatura para separar as bactérias, preservando a integridade celular.

Coloque o tubo no gelo e remova o sobrenadante contendo detritos celulares.

Armazene o pellet bacteriano em temperatura ultrabaixa para análise a jusante.

Para começar, lave um mililitro da cultura Vibrio natriegens durante a noite, centrifugando-a em uma centrífuga de banc