Evolução adaptativa de bactérias usando um sistema de cultura de microgotículas microbianas

Injete uma cultura bacteriana projetada para tolerância ao metanol em um frasco de reagente e um meio de estresse com alta concentração de metanol em outro.

Adicione óleo a ambos e coloque-os em um sistema de cultura de microgotículas microbianas para atingir a temperatura de incubação.

Usando uma bomba, empurre os líquidos através de um chip microfluídico.

A cultura bacteriana se mistura com o meio de estresse. O óleo separa a mistura em microgotículas, que se movem para frente e para trás para o cultivo.

Inicialmente, o alto estresse com metanol retarda o crescimento bacteriano.

Com o tempo, algumas células adquirem mutações que melhoram a utilização do metanol e proliferam.

O sistema mede a densidade bacteriana e seleciona gotículas com maior crescimento.

Estes são remisturados com o meio de tensão para enriquecer para maior utilização do metanol.

Após vários ciclos, extraia gotículas com alta densidade bacteriana, espalhe-as em ágar e incuba.

Isolar e cultivar as colônias formadas em meio líquido para obter cepas adaptadas ao metanol.

Injete os volumes necessários da solução bacteriana inicial, meio fresco e óleo MMC nos frascos de reagentes esterilizados separados para a solução bacteri