Preparação de Películas de Nanocelulose Bacteriana a partir de Bactérias Produtoras de Celulose

Pegue uma microplaca cheia de um meio nutritivo contendo manitol.

Inocule cada poço com uma bactéria produtora de celulose e incube em condições estáticas.

Durante a incubação, as bactérias absorvem manitol e o metabolizam em glicose.

Essa glicose é transportada para complexos de celulose sintase embutidos na membrana bacteriana e polimeriza em cadeias de glucano.

Essas cadeias extrudem para o espaço extracelular, onde cristalizam em microfibrilas.

As microfibrilas se agrupam em estruturas semelhantes a fitas, formando uma matriz de nanocelulose tridimensional.

À medida que mais nanocelulose é produzida, ela se acumula na interface ar-líquido, espessando em películos gelatinosos moldados na forma do poço.

Colhe as películas e incube-as em uma solução alcalina para lisar as células bacterianas, depois remova o meio residual.

Enxágue as películas repetidamente com água para eliminar qualquer solução alcalina restante. Armazene as películas na água para evitar a desidratação. Depois, esterilize-as a vapor para garantir a esterilidade para aplicações futuras.

Transfira dois mililitros do meio de cultura líquida para cada poço de uma placa de cultura de tecido de 24 poços. Pegue duas colônias co