Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Microbiologia
0 visualizações • 2:10 min. • November 28th, 2025
Inocule uma cultura contendo tanto espécies de Salmonella quanto não-Salmonella em um meio de selenita cistina e incube.
A selenito inibe o crescimento de bactérias sensíveis ao selênio ao interromper seus processos metabólicos.
No entanto, bactérias tolerantes ao selênio, incluindo Salmonella, podem metabolizar o selenito e crescer.
Estrie a cultura sobre xilose, lisina desoxicolato ou ágar XLD, e incube.
A salmonela reduz o tiosulfato de sódio no ágar XLD a sulfeto de hidrogênio, que reage com íons férricos no meio para formar sulfeto de ferro negro, produzindo colônias com centros negros.
Em contraste, espécies não-Salmonella que não produzem sulfeto de hidrogênio formam colônias sem centros pretos, permitindo diferenciação visual da Salmonella.
Selecione uma colônia com centro preto e estrie sobre o ágar cromogênico Salmonella para maior especificidade.
O ágar cromogênico contém substratos enzimáticos específicos de Salmonella ligados a cromóforos.
As enzimas Salmonella clivam esses substratos, liberando os cromóforos e formando colônias pigmentadas.
Selecione essas colônias para análise posterior.
Adicione 100 microlitros da cultura pré-enriquecimento a cinco mililitros de meio cristalino de selenita. Depois, incube a cultura a 36 graus Celsius por 18 a 24 horas. Em seguida, colete um laço da cultura e espalhe-a em uma placa.
Depois, incube a placa a 36 graus Celsius por 18 a 24 horas. Após a incubação, selecione colônias suspeitas e transfira-as para uma placa. Incube a placa a 36 graus Celsius por 18 a 24 horas.