Extração de DNA Genômico de Tecido Foliar Vegetal Infectado por Bactérias Patogênicas

0 visualizações • 5:43 min. • November 28th, 2025

Pegue uma folha infectada com Candidatus liberibacter, uma bactéria patogênica.

Corte em pedaços, congele rapidamente em nitrogênio líquido e moa para romper as células da planta e liberar seu conteúdo, incluindo as bactérias.

Adicione um buffer de lisão de núcleos e misture bem.

Incubar em alta temperatura para lisar as membranas, liberando DNA genômico dos núcleos das plantas e das células bacterianas.

Adicione a enzima RNase, inverta o tubo para misturar e incube para degradar o RNA.

Adicione uma solução de precipitação de proteínas e misture para promover a agregação de proteínas. Centrífuga para pellet de proteína e detritos celulares.

Transfira o sobrenadante para um tubo contendo isopropanol e misture para precipitar o DNA em fitas visíveis. Centrifuge para fazer pellets no DNA.

Lave o pellet com etanol para remover impurezas, seque ao ar livre e reidrate o DNA.

Incube em alta temperatura para solubilizar o DNA, depois coloque uma amostra em um microcubeta.

Usando um espectrofotômetro, meça a concentração isolada de DNA.

Primeiro, use uma tesoura limpa para cortar uma folha inteira fresca de uma árvore cítrica e coloque em um saco plástico limpo para sanduíches. Depois, resfrie um pil

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Extração de DNA Genômico