Enriquecimento seletivo e isolamento de bactérias marinhas degradadoras de óleo a partir de amostras de água do mar

Comece com uma amostra de água do mar contendo diversas comunidades microbianas, incluindo bactérias capazes de degradar hidrocarbonetos.

Realize diluições seriadas da amostra em soro fisiológico para reduzir a densidade microbiana.

Adicione o petróleo bruto à água destilada estéril e agite a mistura para solubilizar parcialmente os componentes hidrocarbonetos do óleo.

Deixe a mistura assentar, separando-a em frações de óleo solúveis em água e insolúveis em água.

Prepare placas seletivas de ágar usando cada fração de óleo como única fonte de carbono para enriquecer bactérias que degradam hidrocarbonetos solúveis ou hidrofóbicos.

Coloque as amostras de água do mar diluídas no meio seletivo e incube na temperatura ambiente.

Colônias que emergem dependem de enzimas como hidroxilases e dioxigenases para metabolizar hidrocarbonetos.

Escolha colônias morfologicamente distintas e recoloque em meios frescos contendo a mesma fração de óleo para obter culturas puras de bactérias degradadoras de hidrocarbonetos.

Esse método permite o isolamento seletivo de bactérias marinhas degradadoras de óleo.

Para preparar um meio mínimo contendo fração solúvel em óleo e água e fração insolúvel em óleo e água como