Uma abordagem baseada em Cromatografia Líquida e Espectrometria de Massas para Análise de Metabólitos de S. aureus

0 vistas2:23 min • November 28th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Comece com Staphylococcus aureus suspenso em uma solução de têmpera contendo contas de sílica, armazenadas em baixa temperatura para preservar seu estado metabólico.

Homogeneize as bactérias em condições frias para liberar o conteúdo intracelular, minimizando a degradação enzimática dos metabólitos.

Centrifuge o lisado e colha o supernadante rico em metabólitos.

Adicione um solvente orgânico ao extrato e ao vórtice para precipitar macromoléculas a partir de metabólitos solúveis.

Centrifuge para pelletar o precipitado e transferir o sobrenadante para frascos.

Carregue os frascos em um sistema de cromatografia líquida-espectrometria de massas.

Dentro da coluna de cromatografia, os metabólitos interagem com a fase sólida estacionária com base em suas propriedades químicas.

Adicione um tampão para eluir os metabólitos. Em seguida, direcione os metabólitos para a fonte de ionização por eletrospray do espectrômetro de massa para ionizá-los.

Os íons são então separados com base em suas razões massa-carga.

Os dados resultantes são comparados a um banco de dados de referência para identificar os metabólitos.

Para iniciar a extração do metabólito, primeiro descongele as amostras em gelo úmido. Depois, interrompa as células em um homogeneizador com quatro rajadas de 30 segundos a 6000 rpm, com períodos de resfriamento de dois minutos em gelo seco entre os ciclos.

Clarifique os lisados por 15 minutos em um tubo de microcentrífuga refrigerado pré-refrigerado na velocidade máxima. Após a centrifugação, transfira o sobrenadante para um tubo de microcentrífuga limpo. Usando uma micropipeta, transfira uma pequena porção da amostra para um tubo de microcentrífuga para quantificar o conteúdo residual de peptídeos conforme descrito no protocolo de texto.

Armazene o restante da amostra a menos 80 graus Celsius. Consulte o protocolo de texto para análise dos metabólitos via cromatografia líquida e espectrometria de massa.

07:25

Metabolômica Quantitativa de Saccharomyces Cerevisiae Usando cromatografia líquida juntamente com espectrometria de massa tandem

Vídeos relacionados

0 Visualizações

14:42

Cromatografia líquida acoplada ao índice refrativo ou detecção espectrométrica em massa para perfil metabólito em sistemas livres de células baseadas em lysato

Vídeos relacionados

0 Visualizações

08:14

Extração de Aminoácidos Não Proteicos de Cianobactérias para Cromatografia Líquida - Análise de Espectrometria de Massas em Tandem

Vídeos relacionados

0 Visualizações

07:34

Grande Escala Profiling não-alvo metabolômica de soro por cromatografia líquida de ultra-espectrometria de massa (UPLC-MS)

Vídeos relacionados

0 Visualizações

11:00

Metabolomics irrelevantes de fontes biológicas Usando UltraPerformance cromatografia líquida de alta resolução Espectrometria de Massa (UPLC-HRMS)

Vídeos relacionados

0 Visualizações

14:18

Uma estratégia para sensíveis, Large Scale quantitativos Metabolomics

Vídeos relacionados

0 Visualizações

08:03

Uma abordagem baseada em Espectrometria Tandem Cromatografia Líquida de Massachusetts para análise de metabolitos de Staphylococcus aureus

Vídeos relacionados

0 Visualizações

11:17

Multiplex de monitoramento de drogas terapêuticas por diluição isotópica HPLC-MS/MS de antibióticos em doenças críticas

Vídeos relacionados

0 Visualizações

08:06

Quantificação absoluta do metabolismo da síntese de proteínas livres de células por cromatografia líquida de fase reversa-espectrometria

Vídeos relacionados

0 Visualizações

07:10

Análise de metabolômica baseada em espectrometria líquida não direcionada

Vídeos relacionados

0 Visualizações

Última atualização: 15 agosto 2026