Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Microbiologia
0 visualizações • 2:24 min. • February 2nd, 2026
Comece com um camundongo anestesiado apresentando duas feridas cutâneas excisionais de espessura total no dorso, com as camadas epidérmica e dérmica removidas cirurgicamente.
Um curativo transparente cobre as feridas para isolar o local e evitar contaminação externa.
Permita que o mouse se recupere por um período definido.
Durante esse período, o sangue contendo diferentes componentes entra na ferida. Isso ativa as plaquetas, desencadeando a formação de uma matriz provisória composta por fibrina, fibronectina e proteoglicanos, e inicia a formação de coágulos sanguíneos.
Re-anestesie o camundongo e injete soro fisiológico em cada flanco para manter a hidratação.
Em seguida, injete uma dose definida de uma cepa luminescente de Pseudomonas aeruginosa através do filme em cada ferida.
As bactérias se depositam dentro da matriz provisória, que apoia sua fixação e crescimento.
Juntas, a matriz e o revestimento do filme proporcionam um ambiente favorável para a formação de biofilmes, resultando em uma infecção crônica localizada.
Registre a luminescência para monitorar a infecção bacteriana.
24 horas após a cirurgia, pesar novamente o camundongo reanestesiado e injetar o animal subcutâneamente com 250 microlitros de cloreto de sódio estéril 0,9% pré-aquecido em ambos os flancos.
Em seguida, carregue 100 microlitros da suspensão luminescente P. aeruginosa em uma seringa de proteção para tuberculina de 500 microlitros equipada com uma agulha calibre 27 e injete 40 microlitros de suspensão bacteriana através do curativo transparente em cada ferida.
Certifique-se de que a suspensão bacteriana esteja bem misturada e que o curativo transparente esteja intacto. Certifique-se de furar o curativo transparente apenas uma vez com a agulha, com o bisel para cima.
Depois, coloque o rato na gaiola em uma almofada térmica com monitoramento e forneça uma pasta nutricional de alto teor calórico entre os pellets de comida no chão da gaiola.