Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Microbiologia
0 visualizações • 2:02 min. • February 2nd, 2026
Pegue um camundongo anestesiado com incisões na pele infectado por uma bactéria patogênica.
A bactéria é geneticamente modificada para transportar um plasmídeo contendo o sistema repórter luxABCDE , que possibilita bioluminescência autônoma.
Coloque o rato em posição deitada na plataforma de imagem de bioluminescência.
No local da infecção, os genes luxA e luxB da bactéria codificam a enzima luciferase, enquanto os genes luxCDE codificam enzimas que sintetizam aldeídos gordurosos de cadeia longa, que servem como substrato para a luciferase.
Na presença de oxigênio, a luciferase catalisa a oxidação de seu mononucleotídeo de flavina reduzido, que então reage com o aldeído gordo de cadeia longa, produzindo luz azul-esverdeada.
Essa bioluminescência indica a presença de bactérias metabolicamente ativas no local da infecção.
Usando o sistema de imagem, imageie o local da infecção e quantifique a intensidade do sinal de bioluminescência.
Para imagens in vivo das feridas infectadas, siga os protocolos de contenção de nível dois de biossegurança para o transporte dos camundongos de e para o instrumento de imagem e coloque o camundongo anestesiado em posição prona dentro da câmara de imagem.
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