Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Microbiologia
0 visualizações • 2:34 min. • January 30th, 2026
Comece com um rato acordado, contido para limitar seu movimento.
Incline a cabeça para baixo para expor a parte inferior do abdômen.
Localize a linha média abdominal e identifique um local de injeção ligeiramente descentrado para evitar órgãos internos.
Em seguida, pegue uma seringa contendo uma solução de lipopolissacarídeos, um componente do envelope celular bacteriano Gram-negativo.
Insira a agulha no local para acessar a cavidade peritoneal e injete a solução.
Uma vez injetado, o LPS entra na circulação sistêmica e desencadeia uma resposta imunológica.
Na corrente sanguínea, o LPS se liga à proteína que se liga ao LPS, que a transfere para CD14, uma proteína de membrana das células imunológicas.
O CD14 entrega LPS para MD-2, uma glicoproteína que se associa ao receptor tipo Toll 4 (TLR4), possibilitando a dimerização TLR4.
O TLR4 dimerizado recruta proteínas adaptadoras que ativam vias de sinalização a jusante, induzindo expressão de citocinas pro-inflamatórias e inflamação sistêmica.
Ele modela a translocação microbiana e a ativação imunológica sistêmica nos intestinos e outros órgãos causada por produtos bacterianos.
Manuseie o rato com delicadeza, mas firmeza, e prenda o animal com uma mão. Certifique-se de que o rato esteja segurado com segurança e possa respirar normalmente.
Incline levemente o nariz do rato para o chão para expor o abdômen para injeção. Localize a linha média do abdômen e injete o volume de LPS necessário na parte inferior esquerda ou direita.
É muito importante garantir que a agulha entre na cavidade peritoneal para evitar injeções erradas.
A agulha também não deve penetrar muito fundo na cavidade peritoneal para evitar lesões nos órgãos internos.
Devolva o animal suavemente à gaiola de casa.
Monitore os camundongos para detectar a ocorrência e gravidade da endotoxemia no momento da injeção e a cada 2 horas depois disso por 8 horas. Registre as observações na folha de pontuação anexada.