Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Microbiologia
0 visualizações • 2:29 min. • January 30th, 2026
Pegue um embrião de peixe-zebra infectado com Mycobacterium abscessus, uma bactéria patogênica que ataca o sistema nervoso central e forma abscessos contendo bactérias e células imunes do hospedeiro.
Incubar o embrião no gelo para imobilizá-lo e depois expô-lo a uma overdose de anestésico para interromper a atividade cardíaca e neural, resultando na morte.
Lave o embrião para remover o anestésico residual.
Adicione uma solução detergente para desestabilizar as membranas celulares e lisar o embrião.
Tosquie o lisado através de uma agulha para homogeneizar o tecido e liberar as bactérias.
Centrifuge, descarte o sobrenadante e ressuspenda o pellet em uma solução de surfactante para evitar o aglomeramento bacteriano.
Dilua serialmente a suspensão bacteriana e espalhe-a sobre placas de ágar.
O meio é suplementado com antibióticos para inibir o crescimento de outros microrganismos enquanto as células de Mycobacterium desenvolvidas para resistência a antibióticos proliferam.
Incubar para promover a formação de colônias, possibilitando a quantificação da carga bacteriana do embrião.
Para enumerar as unidades formadoras de colônias ou UFCs no momento desejado, colete cinco embriões por condição de i
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