Imagens ao vivo das interações hospedeiro-patógeno em embriões de peixe-zebra infectados com Mycobacterium abscessus

Comece com embriões anestesiados, transparentes e transgênicos de peixe-zebra que expressam macrófagos marcados fluorescente.

Os embriões são pré-injetados no músculo caudal com a cepa áspera marcada por Mycobacterium abscessus marcada fluorescentemente para induzir uma infecção localizada.

A ausência de glicopeptidolípidos de superfície nessas bactérias promove sua agregação.

Imobilize os embriões em agarose de baixo ponto de fusão e oriente-os para expor o local da infecção.

Quando a agarose solidificar, adicione água para peixes contendo um agente anestésico para manter a anestesia e evitar a desidratação.

Monitore a infecção em tempo real por meio de microscopia de fluorescência.

Após a infecção, os macrófagos endógenos migram em direção às bactérias e fagocitam células individuais.

No entanto, algumas bactérias formam cordões — agregados extracelulares alongados que se replicam, se espalham e resistem à fagocitose, causando morte da célula hospedeira e infiltração imunológica.

Apesar disso, as células imunes falham em eliminar os cordões, permitindo que bactérias e células mortas do hospedeiro se acumulem e formem um abscesso.

Isso revela cording como um M-chave. Estratégia de evasão i