Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Microbiologia
0 visualizações • 1:33 min. • January 30th, 2026
Veja culturas de células renais de porco, com uma cultura pré-tratada com um inibidor que aumenta o pH lisossômico, prejudicando a degradação autofágica-lisossômica.
Adicione bactérias patogênicas e centrifuge para aumentar o contato hospedeiro-patógeno.
Incubar para permitir a invasão bacteriana e internalização nas vesículas endocíticas.
As bactérias internalizadas consomem nutrientes do hospedeiro para se replicar, desencadeando estresse metabólico.
Esse estresse ativa a autofagia, onde uma membrana autofágica se expande ao redor da vesícula, formando um autofagosomo.
Nas células não tratadas, o autofagosomo tem como alvo as bactérias para degradação lisossômica.
Nas células tratadas com inibidores, a depuração autofágica é prejudicada, levando a cargas bacterianas mais elevadas.
Após a infecção, lave as células e aplique um antibiótico para eliminar as bactérias extracelulares.
Adicione uma enzima para digerir a matriz extracelular e desaloje as células.
Lisar mecanicamente as células para liberar as bactérias intracelulares.
Placar os lisados para permitir o crescimento bacteriano.
Menos colônias das células não tratadas confirmam o papel da via de degradação autofagia-lisossômica na eliminação de bactérias intracelulares.