Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Microbiologia
0 visualizações • 1:29 min. • February 26th, 2026
Comece com uma cultura de células imunes infectadas por bactérias patogênicas que formam corpos de inclusão intracelular.
A infecção bacteriana prejudica a via de apresentação do antígeno nas células imunes.
Pegue uma cultura não infectada como controle.
Em seguida, adicione um antígeno proteico modelo e incube.
As células imunes internalizam, processam e apresentam os peptídeos derivados de antígenos modelo em moléculas MHC-I.
Após a incubação, lave as células para remover qualquer antígeno não processado.
Fixe as células e depois adicione um agente de têmpera para neutralizar o fixador.
Introduza as células T CD8+ modificadas e incube.
Essas células reconhecem o fragmento de antígeno exibido na molécula MHC-I, são ativadas e secretam uma enzima que serve como marcador para a apresentação do antígeno mediada pelo MHC-I.
Em seguida, adicione um substrato que reaja com a enzima para produzir um sinal colorimétrico.
Meça a absorção. Uma absorção reduzida na cultura celular infectada em comparação com a cultura não infectada indica eficiência reduzida da apresentação do antígeno MHC-I devido à infecção bacteriana.