Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Microbiologia
0 visualizações • 1:20 min. • February 26th, 2026
Faça culturas de células epiteliais da bexiga urinária humana em uma placa multipoço.
Incube a cultura controle com cloaces selvagens de Enterobacter cloacae, uma bactéria patogênica com estruturas semelhantes a pilos na superfície bacteriana.
A subunidade FimH do pili se liga ao receptor da célula hospedeira, ancorando as bactérias do tipo selvagem à célula hospedeira.
Incubar a cultura experimental com uma cloaca mutante Enterobacter sem FimH.
Sem FimH, as bactérias mutantes não aderem às células hospedeiras.
Após a incubação, lave com um tampão para remover as bactérias não ligadas.
Adicione um tampão de lise e incube sob agitação para desorganizar as células hospedeiras e liberar as bactérias aderidas.
Dilua serialmente os lisados, coloque-os em substrato nutritivo e incube.
O lisado da cultura controle gera colônias, enquanto o lisado da cultura experimental não, confirmando que o FimH é essencial para a adesão bacteriana às células hospedeiras.