Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Microbiologia
0 visualizações • 2:05 min. • February 26th, 2026
Pegue uma placa multipoço contendo suspensões de uma bactéria não patogênica, servindo como controle, e várias cepas de bactérias patogênicas para avaliar sua virulência relativa.
As bactérias são suspensas em um meio com poucos nutrientes para evitar o crescimento excessivo e para imitar um ambiente propício à infecção.
Adicione vermes C. elegans do estágio L4 a cada poço e incube a placa sob agitação contínua para aumentar o contato entre as bactérias e os vermes.
Os vermes se alimentam das bactérias, que entram no trato intestinal e o colonizam.
As bactérias patogênicas liberam toxinas que danificam os tecidos intestinais, levando à toxicidade sistêmica e à eventual morte dos vermes.
Após a incubação, conte as minhocas vivas em cada poço e gere um gráfico para avaliar suas taxas de sobrevivência.
As diferenças nas taxas de sobrevivência dos vermes refletem a virulência relativa de cada cepa bacteriana.
Após cultivar cepas de Aeromonas e medir sua absorção conforme descrito anteriormente, centrifuge o caldo bacteriano a 3.500 g por 15 minutos. Ajuste o caldo bacteriano com meio S e adicione 195 microlitros de caldo bacteriano no meio S a oito poços de uma placa de 96 poços. Lave os worms da placa ENGM com meio M9. Depois, ajuste a concentração da solução de verme para cinco minhocas por microlitro.
Adicione 5 microlitros da solução de minhoca a cada um dos poços da placa de 96 poços. Incube a placa em um shaker e conte o número de vermes vivos em 24, 48 e 72 horas.