Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Microbiologia
0 visualizações • 2:04 min. • February 26th, 2026
Comece com uma placa de múltiplos poços contendo um inserto de poço revestido com colágeno.
Adicione um meio de expansão ao poço.
Os nutrientes do meio promovem a proliferação celular, enquanto os inibidores de diferenciação mantêm um estado semelhante ao do caule.
Adicione uma suspensão de agrupamentos celulares epiteliais derivados de culturas de células-tronco do cólon ao poço, insera e incube.
As células aderem à superfície revestida de colágeno e recebem nutrientes tanto do compartimento superior quanto do inferior.
Os inibidores previnem a diferenciação celular e facilitam a proliferação dos agrupamentos celulares.
Usando um microscópio de contraste de fase, observe a cultura.
Uma vez formada a monocamada, substitua o meio de cultivo por meio fresco, sem inibidores de diferenciação celular.
Isso facilita a diferenciação das células em células epiteliais do cólon maduras com junções apertadas.
Essas células secretam muco e desenvolvem uma monocamada funcional que imita a barreira fisiológica intestinal para estudos de interação hospedeiro-patógeno.
Pipete 600 microlitros de meio de expansão no espaço abaixo de cada inserção. Pipete 100 microlitros de suspensão celular do frasco para cad
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