Estabelecimento de um modelo camundongo para infecção vaginal do grupo B por Streptococcus

Observe uma cultura de Streptococcus do Grupo B, ou GBS, um patógeno bacteriano oportunista.

Dilua a cultura em meio fresco e incube para obter bactérias que se dividem ativamente.

Transfira a cultura para um tubo cônico.

Centrifuge para pelletar as bactérias e depois descarte o sobrenadante.

Lave as bactérias com tampão.

Centrifuge novamente, remova o sobrenadante e ressuspenda as bactérias no tampão.

Em seguida, use uma fêmea de camundongo tratada com hormônios e epitélio vaginal preparado, mais suscetível a infecções.

Prenda o rato. Usando uma ponta fina de pipeta, dispense a suspensão de GBS no lúmen vaginal.

Solte o rato, levante o rabo e deixe as patas dianteiras andarem sobre uma superfície firme.

Isso promove a retenção do inóculo no lúmen vaginal, possibilitando a adesão ao GBS.

Inspecione a abertura vaginal para detectar o retorno do inóculo.

As bactérias aderidas colonizam a superfície epitelial vaginal e estabelecem uma infecção.

O modelo de camundongo com infecção vaginal está pronto para estudos adicionais.

No mesmo dia da injeção, cultive uma cultura líquida de cinco mililitros durante a noite da cepa GBS de interesse no caldo Todd Hewitt, ou THB, a 37 graus Celsius.

Na manhã segu