Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Microbiologia
0 visualizações • 2:34 min. • February 26th, 2026
Veja uma fêmea de camundongo colonizada vaginalmente com Streptococcus do grupo B, ou GBS, um patógeno bacteriano oportunista do trato vaginal.
Prenda o rato e insira um swab umedecido com buffer no lúmen vaginal.
Gire suavemente o swab enquanto aplica uma leve pressão na parede vaginal para desalojar as bactérias presas à superfície.
Imerga o swab em um buffer e agite para suspender as bactérias.
Diluir serialmente a suspensão no tampão e placá-la sobre um ágar diferencial cromogênico contendo um substrato ligado a um cromógeno.
Incube para permitir o crescimento bacteriano.
Durante a incubação, o SGB expressa uma enzima específica que hidrolisa o substrato cromogênico.
O cromógeno liberado sofre oxidação e dimerização espontâneas, formando um composto de cor rosa ou mauve.
Isso resulta em colônias de GBS rosas ou malvas, visualmente distintas de outras colônias bacterianas.
Conte as colônias para quantificar a carga de GBS e avalie sua persistência no modelo de camundongo.
Pouco antes de fazer o swab, pré-molhe o algodão em PBS e prenda um dos camundongos como demonstrado.
Insira o swab 10 milímetros no lúmen vaginal e gire suavemente quatro vezes no sentido horário e quatro vezes no sentido anti-horário, aplicando uma leve pressão na parede vaginal.
Coloque o swab em um tubo de microcentrífuga de 1,5 mililitro contendo 100 microlitros de PBS, e faça um vórtice no tubo e no swab por cerca de 15 segundos para liberar as bactérias das fibras de algodão. Depois, dilua em série cada amostra em PBS e coloque 20 microlitros de 1 a 10 a 10.000 diluições em uma placa de ágar de meio diferencial, preparada conforme as instruções do fabricante, para incubação a 37 graus Celsius por 24 horas. Colônias de GBS aparecem em tons rosa vivo ou malva.