Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Microbiologia
0 visualizações • 3:41 min. • February 26th, 2026
Faça uma suspensão de bactérias patogênicas.
Adicione a suspensão a uma cultura aderida de macrofagos derivados da medula óssea ou células BMDM e incube.
As bactérias usam suas proteínas de superfície para se ligar aos receptores das células hospedeiras, facilitando a aderência.
Enxágue com um tampão para remover bactérias não aderidas.
Adicione substrato fresco e incube.
As bactérias aderidas são então internalizadas pela célula hospedeira.
Adicione um antibiótico para eliminar bactérias não internalizadas.
Descarte o suporte e lave com buffer.
Adicione água gelada para lisar a célula hospedeira, liberando o conteúdo celular, o núcleo e as bactérias internalizadas.
Colete o lisado celular e centrifuge para precipitar detritos celulares.
Colete o sobrenadante que contém a bactéria. Passe por um dispositivo de filtragem para capturar bactérias intactas.
Dobre o papel de filtro e coloque-o em um tubo.
Congele rapidamente em nitrogênio líquido para preservar a integridade celular.
Armazene em condições frias para uso posterior.
Usando 0,5 mililitros da suspensão bacteriana lavada, infecte cada placa de macrófagos. Se usar várias placas, espaça as infecções por 15 minutos para permitir a colheita de
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