Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Microbiologia
0 visualizações • 2:40 min. • March 31st, 2026
Comece com um camundongo anestesiado com uma tampa de placa de Petri colocada sob o abdômen para manter as costas na horizontal.
O camundongo apresenta uma queimadura nas costas que foi infectada com Acinetobacter baumannii, um patógeno bacteriano Gram-negativo.
As bactérias são geneticamente modificadas para carregar um operon de bioluminescência.
Posicione o rato dentro de uma câmara de imagem de bioluminescência mantida em temperatura ideal e comece a fazer a imagem.
No local da infecção, os genes luxA e luxB do operon de bioluminescência codificam a enzima luciferase. Os genes luxCDE codificam enzimas que sintetizam o substrato da luciferase.
A luciferase catalisa a oxidação do substrato e produz luz visível, tornando as bactérias luminescentes.
O sinal de bioluminescência indica a presença de bactérias metabolicamente ativas no local da ferida.
Usando softwares de imagem, quantifique a intensidade do sinal de bioluminescência para estimar a carga bacteriana viável.
Imediatamente após a inoculação, realize a imagem bioluminescente iniciando o software de imagem ao vivo. No painel de controle, clique em Inicializar. Depois, espere até que a cor da caixa de temperatura fique verde, indic
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