Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Microbiologia
0 visualizações • 2:52 min. • March 31st, 2026
Comece com um camundongo anestesiado com as costas expostas, colocado sobre a tampa de uma placa de Petri.
O camundongo tem uma queimadura infectada por bactérias bioluminescentes e resistentes a medicamentos.
Cubra os olhos do mouse com papel alumínio para evitar exposição excessiva à luz azul.
Coloque o mouse sob um dispositivo LED azul a uma distância fixa.
Irradie a ferida com intensidade constante. Aumente o tempo de exposição para administrar doses mais altas.
A luz penetra o tecido da ferida e alcança as bactérias colonizadoras.
Dentro dessas bactérias, moléculas sensíveis à luz absorvem a luz azul e se tornam fotoativadas, produzindo espécies reativas de oxigênio (ROS).
Os ROS danificam componentes bacterianos, incluindo proteínas bioluminescentes, levando à morte celular bacteriana com danos mínimos ao tecido ao redor.
Após cada exposição, realize imagens de bioluminescência para monitorar a viabilidade bacteriana ao redor da ferida.
À medida que a dose aumenta, o sinal diminui de forma correspondente.
Esse declínio indica o efeito antibacteriano do estresse oxidativo induzido pela luz azul.
Após anestesiar os camundongos, de acordo com o protocolo de texto, divida aleatoriamente os animais em um grupo antimicrobiano com luz azul ou tratado com aBL e um grupo controle não tratado. Para o grupo tratado com aBL, use papel alumínio para cobrir os olhos dos camundongos e evitar exposição excessiva à luz. Coloque as queimaduras do mouse diretamente sob o LED com uma tampa de uma placa de Petri de 35 milímetros sob o abdômen do mouse para manter as costas na horizontal.
Em seguida, substitua o medidor de energia por um mouse em uma placa de Petri quadrada. Depois, ajuste a altura do mouse de volta para uma posição onde a distância entre a abertura do LED e a superfície da queima do mouse seja igual à distância entre a abertura do LED e o sensor de luz do medidor de energia. Irradie as queimaduras infectadas com uma irradiância de 100 miliwatts por centímetro ao quadrado.
Administre aBL em alíquotas de 72 joules por centímetro quadrado até que a dose total de 360 joules por centímetro quadrado seja atingida. Após cada dose de luz, realize imagens bioluminescentes das queimaduras de camundongo, como demonstrado anteriormente neste vídeo. Para o grupo controle não tratado, realize imagens bioluminescentes das queimaduras de camundongos usando os mesmos intervalos de tempo usados no grupo tratado com aBL.