Estabelecimento de biofilmes entre reinos bacterianos-fúngicos para estudo da patogênese oral

Comece com culturas de Streptococcus mutans, uma bactéria patogênica oral, e Candida albicans, um patógeno fúngico oportunista.

Transfira colônias isoladas para um meio rico em nutrientes e incube durante a noite para garantir crescimento ativo.

Centrifuge para pelletar as células. Remova o sobrenadante e ressuspenda as células em soro salino estéril até uma concentração definida.

Pegue uma placa multipoço revestida com solução salivar humana para imitar o ambiente oral.

Adicione C. albicans e incube para permitir a fixação no revestimento salival. Lave com soro estéril para remover células não aderentes.

Adicione soro inativado por calor e incube para estimular o desenvolvimento da hifa. Lave o excesso de sérum.

Introduza S. mutans, depois o meio rico em sacarose e incube. S. mutans secreta glucosiltransferase, que se liga ao C. albicans mannans.

Essa enzima catalisa a sacarose em glucanos na superfície fúngica, ancorando as bactérias às hifas e promovendo a proliferação e formação da matriz.

Esse método gera biofilmes inter-reino que modelam sinergias microbianas na patogênese oral.

Cultive S. mutans e C. albicans em placas de ágar sanguíneo a 37 graus Celsius sob condições aeróbicas.

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