Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Microbiologia
0 visualizações • 2:33 min. • February 26th, 2026
Comece com placas contendo bactérias presas à superfície e bactérias planctônicas ou flutuantes livres.
Adicione células de ameba a ambas as amostras.
Coloque uma almofada de agarose contendo Calcein-AM, um corante permeável às células, sobre cada amostra.
Remova o excesso de líquido, deixe secar e incube as placas.
Na placa com bactérias presas à superfície, o contato superficial aumenta os genes de virulência, expressando toxinas.
Essas toxinas perturbam a membrana da ameba e mudam sua forma.
A membrana da ameba danificada permite que mais calceína-AM entre no citoplasma, onde esterases intracelulares as clivam em calcina fluorescente, levando ao seu acúmulo.
Em contraste, bactérias planctônicas, sem contato superficial, permanecem não virulentas, mantendo as membranas da ameba intactas. Isso reduz a entrada de Calcein-AM na ameba, limitando o acúmulo de calceína fluorescente.
Amebas saudáveis também engolem as bactérias não virulentas.
Sob um microscópio fluorescente, células de ameba brilhantes e arredondadas indicam interação bacteriana virulenta, enquanto amebas ténues e amorfas indicam interação bacteriana não virulenta.
Para testar a virulência das células bacterianas presas à superf
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