JoVE Encyclopedia of Experiments
Microbiologia
0 vistas • 1:45 min • February 26th, 2026
Faça criosseções de tecido do ceco, uma região do intestino grosso. Uma seção é de um camundongo infectado apenas com Clostridioides difficile. A outra seção é de um camundongo co-infectado com C. difficile e Enterococcus faecalis.
No tecido co-infectado, E. faecalis metaboliza a arginina do hospedeiro e libera ornitina. C. difficile absorve essa ornitina, promovendo a produção de toxinas associadas ao crescimento e danos aos tecidos.
Para analisar essas amostras usando imagens MALDI, aplique uma camada uniforme de solução matricial.
Carregue as lâminas em um espectrômetro de massa MALDI, onde um laser escaneia o tecido, ionizando aminoácidos através da matriz.
Carregue as lâminas em um espectrômetro de massa MALDI, onde um laser escaneia o tecido, ionizando aminoácidos através da matriz.
Os íons resultantes são separados pela sua relação massa-carga e detectados pelo instrumento para criar mapas espaciais da distribuição dos aminoácidos.
O tecido co-infectado apresenta níveis mais baixos de arginina e ornitina mais altos do que a amostra monoinfectada, o que apoia a patogênese de C. difficile impulsionada pela cooperação microbiana.
Realize a aplicação da matriz MALDI e a espectrometria de massa de imagem MALDI como demonstrado anteriormente.
Analise as imagens de íons de múltiplos réplicas biológicas e compare os resultados para significância por meio de comparações de diagramas de intensidade usando o software estatístico SCiLS.