Ensaio de Resistência ao Etanol para Avaliar a Integridade da Matriz de Biofilme
Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Microbiologia
0 visualizações • 3:23 min. • February 26th, 2026
Veja biofilmes patogênicos derivados de bactérias cultivados em ágar nutritivo.
O biofilme não tratado apresenta bactérias densamente compactadas dentro de uma matriz extracelular protetora.
O biofilme tratado com inibidor apresenta células frouxamente associadas dentro de uma matriz esparsa.
Divida cada biofilme, depois expõe uma metade ao buffer como controle e a outra metade ao etanol para impor estresse antimicrobiano.
No biofilme não tratado e exposto ao etanol, a matriz densa reduz a difusão do etanol e limita a penetração celular, resultando em menos eliminação bacteriana.
No biofilme exposto ao etanol, tratado com inibidores, a matriz esparsa permite que o etanol penetre mais facilmente, levando a maior eliminação bacteriana.
Centrifuge os tubos e remova o sobrenadante. Adicione buffer e sonice para dispersar as células.
Placar as suspensões diluídas e incubar para permitir o crescimento de bactérias viáveis.
Contar unidades formadoras de colônias (CFUs); menos CFUs do biofilme exposto ao etanol tratado com inibidores confirmam que a integridade da matriz é essencial para a resistência ao etanol.
Pegue uma lâmina de barbear limpa e corte as colônias de biofilme em duas partes iguais
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